Résumé
Un guide pratique pour la recherche sur la kisspeptine-10, couvrant la reconstitution du peptide, les protocoles de dosage pour l'administration intraveineuse et sous-cutanée, les considérations de conception expérimentale pour les études sur les hormones reproductives, les exigences de stockage et les paramètres de suivi de la sécurité.
La kisspeptine-10 est fournie à des fins de recherche sous forme de poudre blanche lyophilisée, généralement dans des flacons contenant 1 mg ou 5 mg de peptide. Ce guide couvre les aspects pratiques du travail avec la kisspeptine-10 basé sur les protocoles de recherche clinique publiés.
La reconstitution de la kisspeptine-10 nécessite une attention aux propriétés chimiques du peptide. Le diluant préféré pour les préparations de recherche est le sérum physiologique stérile normal (0,9 pour cent de chlorure de sodium) ou l'eau stérile pour injection, selon la voie d'administration prévue. Pour reconstituer un flacon de 1 mg, ajouter 1 mL du diluant choisi lentement le long de la paroi intérieure du flacon, produisant une concentration de 1 mg par mL (1000 mcg par mL). Faire tourner doucement pour dissoudre ; ne pas secouer ni vortexer.
Le dosage de recherche de la kisspeptine-10 dans les études humaines a généralement utilisé des protocoles basés sur le poids, avec des doses exprimées en nanomoles par kilogramme de poids corporel. Le poids moléculaire de la kisspeptine-10 est d'environ 1302 daltons. Les protocoles de recherche clinique publiés ont utilisé des doses en bolus intraveineux allant de 0,1 à 1,0 nmol par kilogramme, 0,3 nmol par kilogramme étant une dose couramment utilisée produisant des réponses robustes de LH.
L'administration en bolus intraveineux est la voie la plus soigneusement caractérisée dans la recherche clinique. Le protocole standard consiste à administrer la dose calculée en 1 à 2 minutes, avec un prélèvement sanguin en série à des intervalles prédéfinis pour mesurer LH, FSH, testostérone ou estradiol. La réponse de LH atteint généralement son maximum dans les 30 à 60 minutes suivant l'administration IV et revient vers la ligne de base dans les 2 à 4 heures.
La relation dose-réponse de la kisspeptine-10 est non linéaire, les faibles doses produisant des réponses pulsatiles de LH ressemblant à la pulsatilité physiologique de GnRH et les doses plus élevées produisant une élévation de LH plus soutenue et tonique.
Le stockage de la kisspeptine-10 suit les directives standard de manipulation des peptides. Le peptide lyophilisé doit être conservé à moins 20 à moins 80 degrés Celsius, protégé de la lumière et de l'humidité. Les peptides kisspeptine contiennent un résidu tryptophane susceptible d'oxydation, la protection de la lumière est donc particulièrement importante.
La surveillance de la sécurité dans la recherche sur la kisspeptine-10 doit inclure la mesure basale et en série des hormones reproductives (LH, FSH, testostérone ou estradiol). Les sujets ayant des conditions sensibles aux hormones doivent être exclus des protocoles de recherche.
