MGF : Guide Pratique de Recherche et d'Utilisation

Travailler avec le Facteur de Croissance Mécano natif présente des défis uniques qui le distinguent de la plupart des autres peptides de recherche. Sa demi-vie extrêmement courte dans le sérum, mesurée en minutes plutôt qu'en heures, signifie que les pratiques standard de manipulation des peptides doivent être adaptées pour s'assurer que le composé atteint son tissu cible sous forme biologiquement active. La reconstitution de MGF nécessite une attention particulière en raison de la susceptibilité du peptide à la dégradation. Commencer avec un flacon lyophilisé stocké à moins 20 degrés Celsius et le laisser s'équilibrer à température ambiante pendant environ 5 à 10 minutes. Étant donné que MGF sera utilisé immédiatement après la reconstitution dans la plupart des protocoles, l'eau bactériostatique est le véhicule de reconstitution standard. Pour un flacon typique de 2 milligrammes, l'ajout de 2 millilitres d'eau bactériostatique produit une concentration de 1000 microgrammes par millilitre. La différence critique entre l'administration de MGF et celle d'autres peptides est l'exigence absolue d'injection intramusculaire directement dans le muscle cible. L'injection sous-cutanée de MGF natif est essentiellement inefficace car le peptide est dégradé dans le tissu sous-cutané et la circulation sanguine avant de pouvoir atteindre tout tissu musculaire distant. Dans les recherches sur les rongeurs, cela implique une injection dans le ventre du muscle cible, typiquement le tibial antérieur, le gastrocnémien ou le quadriceps, en utilisant une seringue à aiguille fine. Le dosage de recherche du MGF natif dans les études précliniques publiées a généralement varié de 5 à 50 microgrammes par site d'injection pour les modèles rongeurs. Le moment de l'administration de MGF par rapport à la charge ou au dommage musculaire est une variable expérimentale importante. Dans la physiologie naturelle de l'adaptation musculaire, le pic d'expression de l'ARNm de MGF se produit dans les premières heures après la charge mécanique et diminue avant l'augmentation de l'expression d'IGF-1Ea. Les chercheurs étudiant le rôle de MGF dans l'adaptation à l'exercice administrent généralement le peptide dans les 1 à 4 heures suivant le protocole d'exercice ou de charge mécanique. Le stockage du MGF natif nécessite une attention stricte à la gestion de la température. La poudre lyophilisée doit être conservée à moins 20 degrés Celsius, où elle maintient sa stabilité pendant environ 12 mois. Une fois reconstitué en eau bactériostatique, la solution devrait idéalement être utilisée immédiatement. Les considérations de conception expérimentale pour la recherche MGF doivent tenir compte de plusieurs facteurs spécifiques à ce peptide. Premièrement, parce que MGF est injecté localement dans des muscles spécifiques, les muscles controlatéraux peuvent servir de contrôles internes. Deuxièmement, la nature transitoire de l'exposition à MGF signifie que les mesures de résultats doivent être correctement temporisées. L'activation des cellules satellites peut être évaluée par incorporation de BrdU ou EdU à 24 à 48 heures après l'administration de MGF, tandis que l'hypertrophie et la régénération des myofibres nécessitent des périodes d'observation plus longues de 1 à 4 semaines.